一、 产品详细描述

品牌名称：STEMCELL Technologies / BioLife Solutions

英文产品名：CryoStor® CS10 Cell Freezing Medium

中文产品名：CryoStor® CS10 无血清细胞冻存液

核心货号：#07930, #07952, #07955, #07959, #07940, #07931, #100-1061 (涵盖不同规格与包装形式)

主要规格：提供 10 mL 小瓶、16 mL 小瓶、常规瓶装、备用瓶装以及医疗级冻存袋等多种包装选项，以满足从日?？蒲械焦ひ祷赴瘟频母骼嘤τ贸【?。

核心成分：含 10% 医用级二甲基亚砜 (DMSO)，以及其他精心配比的高纯度缓冲盐类与营养物质。

产品配方属性：

•   无血清 (Serum-Free)：杜绝了动物血清带来的病毒、支原体等污染风险。

•   无动物源成分 (Animal Component-Free / Xeno-Free)：避免了异种免疫反应，符合严格的临床级与监管标准。

•   成分明确 (Chemically Defined)：所有组分均清晰已知，批次间一致性高，确保了实验的可重复性。

生产工艺标准：严格按照 cGMP (现行良好生产规范) 标准制造，选用 USP (美国药典) 级别的最高品质原料，降低批间差异。

包装形式：提供 50 mL、80 mL等多种包装选项

主要应用领域：专为人类、小鼠、大鼠、非人灵长类等物种的多种敏感细胞类型设计，广泛应用于脐带血库建库、免疫细胞研究（CAR-T、TIL等）、干细胞生物学、类器官研究以及上皮细胞研究等领域。

二、 产品核心优势与特点

1. 细胞?；び敫吒此章?/span>

  产品经过多种高难度细胞类型的严苛验证。实验数据表明，无论是人外周血来源的 Pan-T 细胞，还是极易受冻存损伤的人 B 淋巴细胞，使用 CryoStor® CS10 冻存并复苏后，其存活率均可稳定维持在 94% 至 98% 的高水平。更重要的是，复苏后的细胞能够保留其生物学功能，例如 T 细胞在复苏后仍可对 PMA/离子霉素或 CD3/CD28 刺激产生强烈的 IL-2 分泌反应；B 细胞复苏后经 CD40 和 IL-21 激活，依然具备强劲的 IgG 抗体分泌能力。

2. 安全性：无血清、无动物源、成分明确

  传统冻存液常依赖胎牛血清 (FBS) 来提供蛋白质?；ぃ庖惨肓伺尾钜?、内毒素污染甚至朊病毒感染的风险。CryoStor® CS10 摒弃了血清和任何动物源成分。其化学成分全明确，不仅大幅提升了细胞库存的安全性，更为后续的药物筛选、细胞治疗产品（ATMP）的临床转化扫清了 regulatory（监管）障碍。

3. 符合 cGMP 与 USP 级别的严苛质控

  产品在生产过程中严格遵循 cGMP 规范，所有原材料均达到或超过 USP 标准。每一批次产品均需经过无菌测试、内毒素检测以及基于活细胞的质控检测，并拥有详尽的 FDA 主文件 (Master File) 支持。这种工业级的品控标准，是追求实验可重复性（Reproducibility）和合规性（Compliance）的科研与工业用户的理想选择。

4. 即用型设计，提升实验效率

  CryoStor® CS10 为无菌过滤的即用型液体试剂，无需繁琐的配制、调渗透压或过滤除菌步骤?？考从玫奶匦圆唤鼋谑×吮蟮氖笛槭奔?，更避免了因配制操作不当引入的污染风险。

三、 储存与运输条件

为了保证产品的稳定性和最佳性能，正确的储存与运输至关重要：

•   运输条件：产品通常在 2-8°C 冷链条件下进行运输。收货后，请检查包装内的温度监控记录（如有），确保产品在运输过程中始终处于冷藏状态。

•   储存条件：收到产品后，应立即置于 2-8°C 的冰箱中避光保存。严禁冷冻保存，因为冻结会导致溶液中的某些成分发生理化性质改变，从而影响其?；ばЧ?/span>

•   保质期：在未开封且严格按照上述条件储存的情况下，产品具有长达 18-24 个月的有效期（具体日期请参照产品瓶身标签）。

•   开封后使用：一旦开封，建议在无菌环境下操作，并尽量在规定的短期内（通常为 1-3 个月）使用完毕，每次使用后务必拧紧瓶盖，防止水分蒸发和 CO2 吸收导致的 pH 值变化。

四、 工作原理深度解析

1. DMSO 的细胞膜穿透与冰点降低机制

CryoStor® CS10 含有 10% 的 DMSO（二甲基亚砜）。DMSO 是一种强力且具有膜通透性的冷冻?；ぜ痢Ｔ诮滴鹿讨?，DMSO 能够迅速穿透细胞膜，进入细胞内部。从热力学角度来看，DMSO 能够显著降低细胞内外水溶液的冰点，防止水在降温过程中形成尖锐、致死的冰晶。从渗透力学角度来看，随着细胞外冰晶的形成，细胞外液的溶质浓度急剧升高，如果不加干预，细胞内的水分会大量渗出（脱水），导致细胞质浓缩和不可逆的膜系统损伤。DMSO 的存在提高了细胞膜对水的通透性，使得细胞能够在受控的条件下缓慢、均匀地脱水，维持细胞内外的渗透平衡，从而避免“溶液效应"造成的伤害。

2. 专有赋形剂与玻璃化转变的协同作用

除了核心的 DMSO，CryoStor® CS10 还含有其他精心筛选的缓冲盐和营养赋形剂。这些成分在冷冻状态下能够与细胞膜上的磷脂双分子层发生特异性相互作用，抑制因低温导致的膜脂相变（即细胞膜从柔韧的液晶态转变为僵硬的凝胶态）。通过稳定细胞膜的流动性，这些赋形剂有效防止了细胞膜在冻融过程中的破裂。此外，在特定浓度的 DMSO 和其他成分的协同下，细胞悬液在极速降温时更容易进入“玻璃化"状态——即液体极其粘稠但不形成结晶的固态，这为细胞提供了一个类似琥珀的、极度稳定的物理?；せ肪场?/span>

3. 抑制低温诱导的分子应激反应

近年来的研究揭示，细胞对冷冻的感知不仅仅是一个物理过程，更是一个引发强烈分子应激反应的过程。低温会激活细胞内的 p38 MAPK 等应激信号通路，导致 DNA 损伤修复机制启动和细胞周期停滞，这往往是复苏后细胞生长迟缓甚至凋亡的根本原因。CryoStor® CS10 的独特配方能够有效缓冲这些温度诱导的分子应激信号，从源头上减轻细胞的“冻存创伤"，这也是为何使用该产品冻存的细胞在复苏后不仅存活率高，而且能够快速恢复代谢与增殖活性的核心原因。

五、 解决实验中的哪些痛点问题？

1. 解决“复苏即死"与存活率低下的问题

  许多实验室使用自配的“90% FBS + 10% DMSO"冻存液，由于缺乏精确的渗透压和 pH 调控，细胞在冻融过程中承受极大的物理化学压力，导致复苏后大量死亡。CS10 通过优化渗透压和添加膜稳定成分，将复苏存活率稳定提升至 95% 以上，挽救了珍贵的原代细胞或样本。

2. 消除批次间差异，保障实验可重复性

  使用含血清冻存液时，不同批次的血清生长因子和抑制剂含量各异，这会导致一部分细胞在冻存前受到意外刺激，影响后续实验结果。CS10 成分全明确且无生物活性干扰因子，确保了每一次冻存都是在一个绝对一致的生化环境中进行，满足了高标准科研与 GMP 生产对可重复性的苛刻要求。

3. 规避外源污染风险，满足临床级标准

  在细胞治疗（如 CAR-T、TCR-T、MSC 治疗）的研发与申报过程中，任何动物源成分（Xeno）的引入都会增加临床试验的风险和监管审批的难度。CS10 的无动物源、无血清、cGMP 生产背景，使其成为细胞治疗公司建立封闭、合规、安全的细胞冻存工艺的优选。

4. 保持细胞高敏感度与多向分化潜能

  对于诱导多能干细胞（iPSCs）和胚胎干细胞（ESCs）而言，常规的冻存条件极易诱发其自发分化或导致染色体异常。CS10 提供的温和?；つ芄晃终庑└上赴奈捶只刺驼５暮诵?，确保其多向分化潜能不受影响。

5. 简化操作流程，提升实验室通量

  告别繁琐的称量、配液和过滤除菌步骤。CS10 的即用型特性让研究人员能够将精力集中在核心实验上，同时也减少了因人为配液失误导致的昂贵细胞报废事故。

六、 适用范围与靶向细胞类型

CryoStor® CS10 具有极广的普适性，经大量文献与实验验证，以下细胞类型均能取得佳的冻存效果：

•   免疫细胞：T 细胞（包括原代 T 细胞、CAR-T 细胞）、B 细胞、自然杀伤细胞（NK 细胞）、巨噬细胞、单核细胞、粒细胞等。

•   干细胞：人间质干/祖细胞（MSCs）、造血干细胞（HSCs）、诱导多能干细胞（iPSCs）、神经干/祖细胞等。

•   体细胞与肿瘤细胞：CHO 细胞及其他细胞系、杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞、类器官（Organoids）等。

•   物种来源：广泛适用于人类、小鼠、大鼠、非人灵长类及其他多种哺乳动物的细胞。

七、 标准化使用方法与操作流程

为了获得最佳的冻存效果，充分发挥 CryoStor® CS10 的性能，建议严格按照以下步骤进行操作：

第一阶段：冻存前准备

1. 细胞状态评估：确保待冻存的细胞处于对数生长期或指定的健康状态。细胞活力应大于 90%。过度融合或受损的细胞在冻存后恢复效果较差。

2. 离心与重悬：将细胞消化下来（如果是贴壁细胞）并进行细胞计数。以 300g 左右的离心力离心 5 分钟，弃去旧培养基。用预冷的 CryoStor® CS10 轻柔重悬细胞，调整细胞密度。一般建议密度为 1×10^6 到 1×10^7 细胞/mL，具体密度可根据细胞类型和后续实验需求调整。

第二阶段：分装与密封

3. 分装：将重悬好的细胞悬液迅速分装至无菌的冻存管或专用的细胞冻存袋中。为避免频繁冻融，建议根据单次实验用量进行分装（如 1 mL 或 5 mL/管）。

4. 密封与标记：拧紧冻存管帽，确保绝对密封（可在管口缠上封口膜以防渗漏）。在管身清晰标记细胞名称、冻存日期、细胞代数及操作者姓名。

第三阶段：受控速率降温（关键步骤）

5. 梯度降温：细胞对降温速率极为敏感。最快的结冰损伤往往发生在 -15°C 到 -40°C 之间。强烈建议使用程序降温盒（如含有异丙醇的 Nalgene 冻存盒）或将冻存管置于专用液氮气相罐的降温架上，以 -1°C/分钟 的最佳速率进行降温。

6. 转移至液氮：当温度降至 -80°C 以下（通常在 -80°C 冰箱中放置 4 小时以上，或程序降温箱指示达到低温），迅速将冻存管转移至液氮气相（-150°C）或液相（-196°C）中进行长期保存。

第四阶段：复苏与清洗

7. 快速解冻：从液氮中取出冻存管后，必须立即放入 37°C 水浴锅中，并轻轻摇晃，使其在 60-90 秒内融化。此步骤旨在让细胞迅速越过结冰危险温度区，防止重结晶损伤。

8. 稀释与清洗：由于高浓度 DMSO 在常温下对细胞有毒性，解冻后需立即将细胞悬液转移至含有适量预温（37°C）的新鲜培养基的离心管中，缓慢混匀以稀释 DMSO。以 300g 离心 5 分钟，弃去含 DMSO 的上清液。

9. 恢复培养：用适宜的培养基重悬细胞沉淀，接种至培养皿或培养瓶中，放入 37°C、5% CO2 的培养箱中培养。根据细胞类型，在复苏后 24-48 小时内观察细胞贴壁情况及活力恢复状态。

八、 常见问题与解决方案 (Troubleshooting)

Q1：为什么复苏后的细胞贴壁率很低，或者圆缩不展开？

•   可能原因：冻存前细胞状态不佳（如消化过度、污染、密度过低）；降温速率过快导致冰晶刺破细胞膜；复苏后清洗不，残留 DMSO 抑制细胞贴壁。

•   解决方案：优化冻存前的细胞培养条件，确保细胞汇合度在 70%-80% 且活力佳。务必使用程序降温盒控制降温速率。复苏后增加一次 PBS 洗涤步骤，或在培养基中稀释至 DMSO 浓度低于 0.1%。

Q2：细胞复苏后存活率很高，但就是不分裂增殖？

•   可能原因：细胞在冻存/复苏过程中经历了严重的冷应激，导致细胞周期停滞在 G0/G1 期；冻存密度过低导致促生长因子缺乏。

•   解决方案：这属于正常的生理应激反应。建议在复苏初期提高接种密度，并在培养基中添加适量的特定生长因子（如针对间充质干细胞的 bFGF，或针对 T 细胞的 IL-2），通常培养 3-5 天后细胞可恢复正常分裂。

Q3：能否直接将细胞在 4°C 冰箱中冷却过夜，再放入 -80°C？

•   解答：绝对不建议。在 0°C 到 -10°C 的相变阶段，细胞对温度变化极为敏感，必须保持恒定的 -1°C/分钟降温速率。4°C 过夜会导致细胞在危险温度区停留时间过长，引发大规模死亡。必须使用异丙醇冻存盒或程序降温仪。

Q4：产品说明书上写不能冷冻保存，那放在 2-8°C 保质期是多久？开封后能放多久？

•   解答：CryoStor® CS10 中含有特定比例的盐和缓冲体系，冷冻会导致晶体析出破坏配方平衡。未开封时在 2-8°C 避光保存可稳定至标示有效期（通常18-24个月）。开封后，因频繁接触空气会导致 CO2 溶入改变 pH 值，建议在 1 个月内用完，每次取用后立即密塞冷藏。

Q5：这款冻存液可以直接用于流式细胞术（FACS）分选后的稀有细胞冻存吗？

•   解答：可以，但需注意。CryoStor® CS10 非常适合冻存免疫细胞。但由于分选后的细胞数量极少，建议在冻存前一定要进行细胞计数，并按最小有效体积（如 100 μL 体系）进行冻存，复苏后先离心去除 DMSO，再加入 96 孔板或 48 孔板中扩增。

Q6：如果实验室没有液氮罐，放在 -80°C 冰箱可以长期保存吗？

•   解答：不建议长期保存。-80°C 虽然能减缓细胞代谢，但并不能全阻止。长期置于 -80°C，细胞仍会因缓慢的冰晶生长（重结晶）和溶液效应而逐渐丧失活力。液氮气相（-150°C）才是真正停止一切生化反应的休眠环境。

Q7：产品中含有 DMSO，复苏后为什么要尽快洗掉？

•   解答：DMSO 是一种强的溶剂，能够穿透细胞膜。在 37°C 培养环境下，低浓度的 DMSO 会干扰细胞骨架的正常组装，影响细胞贴壁和迁移，甚至诱导细胞分化或凋亡。因此，复苏后必须通过稀释和离心去除 DMSO。

Q8：可以将不同批次的 CryoStor® CS10 混合使用吗？

•   解答：虽然各批次间差异极小，但为了严谨起见，不建议自行混合。如果实验对一致性要求高（如临床试验用药），请一次性领取足够整个项目周期用量的同一批次产品。

Q9：冻存管在液氮中爆炸了，可能是什么原因？

•   解答：这通常是因为冻存管未拧紧或使用了不耐压的劣质管材。液氮可能会渗入未密封好的冻存管中，当拿到室温水浴解冻时，液氮瞬间气化膨胀，导致炸管。请务必使用专用的耐液氮冻存管，并在浸入液氮前确认螺纹口已拧紧（但不要过度用力导致滑丝）。

Q10：该冻存液适用于非哺乳动物细胞（如昆虫细胞或细菌）吗？

•   解答：CryoStor® CS10 的配方是专门针对哺乳动物真核细胞的渗透压和膜脂特性优化的。对于昆虫细胞（如 Sf9/Sf21）或原核生物（大肠杆菌等），其细胞壁结构和渗透脆性不同，建议使用专门针对该类微生物的冻存?；ぜ痢?/span>

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（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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