一、 产品描述

产品基本信息

•   英文全名：TeSR™-E6 （Chemically Defined, Xeno-Free, Serum-Free Medium）

•   中文全名：TeSR™-E6 （成分明确、无血清、无异种成分的多能干细胞培养基）

•   核心品牌：StemCell Technologies（干细胞科技公司，简称 SCT）

•   常见货号参考：05926

•   常见规格参考：500mL

•   核心种属适用性：经过严格验证，专为人类来源的多能干细胞设计，包括人类胚胎干细胞（hESCs）和人类诱导多能干细胞（hiPSCs）。

•   核心应用领域：作为成分明确的细胞分化基础培养基，特别适用于需要去除转化生长因子 β（TGF-β）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的定向分化实验，同时也是常规无饲养层细胞高通量筛选与维持扩增的优质选择。

产品外观与理化特性

TeSR™-E6 基础培养基在出厂时通常为清澈透明的液体，呈淡红色或淡橙色（源于添加的 pH 指示剂酚红，便于肉眼监测培养环境的酸碱度变化）。产品经过 0.1 微米（μm）的精密无菌过滤，并灌装在医用级聚对苯二甲酸乙二醇酯（PETG）或聚碳酸酯（PC）无菌瓶中。每一批次产品在放行前均经过严格的细胞培养性能测试，确保其能够支持多能干细胞在连续传代中保持正常的核型稳定性、高水平的碱性磷酸酶活性以及经典的干细胞克隆形态。

二、 产品核心特点

本产品的设计理念围绕“精准控制"与“安全性"展开，其核心特点可以深度归纳为以下四个维度：

1.  成分明确（Chemically Defined）

    传统培养基如同“黑盒"，而 TeSR™-E6 则是一本“打开的书"。本培养基中的所有营养成分、维生素、微量元素、脂质前体以及重组蛋白生长因子均是以精确的浓度添加，没有任何一种成分是模糊不清的提取物。这种高度的透明性意味着研究人员在使用时拥有绝对的知情权，能够根据自身的实验需求精准推算培养基的渗透压、pH值缓冲能力以及特定信号通路的激活强度，极大地提升了实验的可控性与数据的可重复性。

2.  绝对无血清（Serum-Free）

    本培养基不含有任何形式的动物或人类血清。血清虽然是传统细胞培养的促生长利器，但其内部蕴含的数千种未知蛋白质、激素和脂质就如同“盲盒"一样，不仅会带来巨大的批次间差异（Lot-to-Lot Variation），还会在后续的转录组测序（RNA-seq）或表观遗传分析（ATAC-seq）中造成严重的背景噪音。采用无血清配方，根绝了这些变量，为单细胞测序等高灵敏度组学分析保驾护航。

3.  无异种成分（Xeno-Free）

    所有组成成分均非来源于动物（Non-Animal Derived），特别是其中添加的生长因子均为通过基因工程在大肠杆菌或酵母表达系统中重组表达并纯化而来。这一特性不仅消除了牛海绵状脑?。˙SE）、猪细小病毒（PPV）等动物源性病原体污染的风险，更为未来多能干细胞向临床治疗方向的转化铺平了道路，满足了严苛的 GMP（药品生产质量管理规范）级应用的前置要求。

4.  基于经典配方的精准减法优化

    TeSR™-E6 并非凭空创造，而是建立在干细胞界“金标准"——TeSR™-E8™ 的成熟配方之上。研发团队通过精准剔除 TGF-β 和 bFGF 这两种具有强效多能性维持作用的细胞因子，巧妙地打破了细胞的自我更新平衡。这种设计不是为了“维持"，而是为了“引导"，它让细胞处于一种“随时待命分化"的临界状态，极大地降低了后续启动分化程序时的阻力，是构建分步式分化方案的理想起点。

三、 储存条件与试剂准备

为了保证产品中各种不稳定成分（特别是重组蛋白和维生素）的生物活性，正确的储存与配制操作至关重要。

1. 基础培养基的储存

•   短期储存（频繁使用期间）：将未开封或已开封的 TeSR™-E6 基础培养基瓶直接置于 4℃ 冰箱中避光保存。在此条件下，建议在保质期内尽快使用完毕，通常不超过 2-3 周。

•   长期储存（不频繁使用）：若短期内不打算使用该培养基，应将其分装后置于 -20℃ 或 -80℃ 超低温冰箱中冷冻保存。需要注意的是，反复冻融会导致某些蛋白质变性或沉淀析出，因此强烈建议在分装时按照每次实验所需的用量（如 50 mL 或 100 mL）进行分装，避免整瓶反复冻融。

•   解冻操作：从超低温冰箱取出的培养基需在 4℃ 环境下缓慢解冻过夜，或在室温下轻轻摇晃加速解冻。严禁使用 37℃ 水浴锅快速加热解冻，高温会瞬间破坏生长因子的空间构象致其失活。

2. 补充剂的添加与储存

TeSR™-E6 作为一款需要即配即用的精细培养基，通?；崤浔敢恢ㄋ跣偷牟钩浼粒⊿upplement）。

•   储存条件：补充剂通常在制造后以冻干粉（Lyophilized Powder）形式提供，需置于 -20℃ 密封保存；若已复溶（Reconstituted），则应在 4℃ 短期保存（通常不超过 1-2 周），长期不用需分装冻存于 -80℃。

•   配制流程：在超净工作台内，将解冻至室温的基础培养基瓶盖打开，使用无菌移液管或量筒，根据说明书指定的比例（例如 1:50 或 1:100，具体比例请务必查阅对应批次的产品手册）量取所需体积的补充剂。将补充剂缓缓滴入基础培养基中，同时轻柔地晃动瓶子使其充分混匀。切勿剧烈振荡，以免产生大量气泡导致蛋白质表面变性。

•   预热使用：配制完成的培养基在使用前，需提前从 4℃ 取出，置于 37℃ 水浴锅或恒温箱中预热至 37℃。细胞在接触温度适宜的培养基时状态最佳，骤冷或骤热均会引起细胞应激甚至凋亡。

四、 工作原理：深层次的作用机制解析

要真正驾驭一款细胞培养基，就必须洞悉其在细胞微观层面触发的一系列分子级联反应。多能干细胞的命运抉择主要由几条核心的信号通路交织控制，而 TeSR™-E6 正是通过精准调控这些通路来发挥作用。

1. 多能性维持与分化的“阴阳平衡"

在经典的干细胞维持培养基（如 TeSR™-E8™）中，外源添加的 bFGF 和 TGF-β 扮演着“阳"的角色。bFGF 主要通过激活 MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 通路来促进细胞的增殖并抑制神经外胚层分化；TGF-β 则通过 SMAD2/3 信号通路抑制视黄酸（RA）介导的中内胚层分化。两者协同作用，将细胞牢牢锁定在 pluripotent（多能）状态。

而 TeSR™-E6 的巧妙之处在于实施了“精准减法"——去除了 bFGF 和 TGF-β。这一操作相当于撤去了压制细胞分化的“刹车"。在没有这两种核心多能性细胞因子的情况下，细胞内部的多能性调控网络（如 Oct4, Sox2, Nanog 等核心转录因子的正反馈环路）由于缺乏外部信号支持而逐渐衰减。细胞开始自发地上调分化相关的基因表达，进入一个极其脆弱但又充满潜力的“预分化（Primed）"状态。

2. 细胞外基质（ECM）与整合素（Integrin）的协同作用

干细胞不仅需要化学信号（可溶性因子），还需要物理信号（基质硬度与黏附）。TeSR™-E6 中含有优化的脂质载体和微量元素，这些成分虽然不直接结合细胞，但它们能够调节细胞膜的流动性和表面受体的折叠。当细胞铺展在 Matrigel 或 Vitronectin（玻连蛋白）等细胞外基质上时，细胞膜上的整合素受体将外部的物理锚定转化为内部的化学信号（如 FAK 磷酸化）。TeSR™-E6 提供的营养底物确保了这一机械转导过程能够顺利进行，从而维持细胞的基础存活与代谢活性，为接受后续的分化诱导信号做好准备。

3. 无血清环境下的代谢重塑

血清中含有大量的脂肪酸和胆固醇，细胞依赖其进行膜合成。在无血清的 TeSR™-E6 中，这些成分被精确计量的特定脂质前体和抗氧化剂所取代。这迫使细胞的代谢模式从“攫取型"向“合成型"转变，激活了内质网中的固醇调节元件结合蛋白（SREBPs）通路，这不仅保证了细胞膜在快速增殖中的更新需求，还意外地发现这种特定的代谢压力能够进一步促使表观遗传重编程，增加分化过程中的基因表达动态范围。

五、 解决实验中的哪些核心痛点？

在实际的干细胞研究一线，科研人员常常面临诸多令人头疼的棘手问题。TeSR™-E6 的出现，正是为了精准切入并解决这些痛点：

1.  消除分化实验的“启动延迟"与“背景噪音"

    在传统方案中，要将干细胞从维持状态切换到分化状态，通常需要一天的时间来清洗旧培养基并让内源性因子耗尽。这个过程的不可控性强。使用 TeSR™-E6 作为基础分化培养基，可以直接跳过这个耗时的清洗期，因为其内部原本就不含有抑制分化的 TGF-β 和 bFGF，细胞一接种进去便立刻暴露在分化信号的敏感窗口期，大大缩短了实验周期，提高了分化效率的均一性。

2.  攻克批次间差异导致的实验无法重复

    “上个月做成功的分化，这个月又失败了"，这往往是血清或条件培养基惹的祸。TeSR™-E6 的成分明确特性粉碎了这一问题。无论你在北京的实验室还是上海的实验室，无论是今年采购还是明年采购，只要配方比例不变，细胞的响应曲线就一致。这对于需要长期推进的临床前研究或需要发表在高影响因子期刊上的数据尤为重要。

3.  规避下游基因编辑或组学分析的干扰

    许多研究团队在进行 CRISPR 敲除或过表达后，需要通过荧光激活细胞分?。‵ACS）来富集阳性克隆。血清中的多种蛋白质会与抗体发生非特异性结合，导致假阳性或背景过高。TeSR™-E6 的无血清、无异种蛋白特性，为流式分析和单细胞测序提供了一个极度“干净"的背景，确保了微弱信号也能被灵敏捕获。

六、 详细使用方法与标准操作流程 (SOP)

为了充分发挥 TeSR™-E6 的性能，建议严格按照以下步骤进行操作。本流程以 6 孔板（约 10 cm2 生长面积）培养 hPSCs 为例。

第一部分：每日维护与换液操作

1.  预热培养基：从 4℃ 冰箱取出配制好的 TeSR™-E6 培养基，置于 37℃ 水浴锅中预热 15-30 分钟。同时，将含有细胞的培养板从培养箱中取出，放在超净工作台的支架上。

2.  观察细胞状态：在显微镜下快速扫视细胞。健康的 hPSCs 应该呈现高核质比、明显的克隆边缘以及光滑的单层铺展。如果发现克隆边缘有扁平状的 differentiating cells（分化细胞，通常形态类似上皮细胞或成纤维细胞），应记录其位置，以便后续传代时避开。

3.  更换新鲜培养基：使用无菌移液器，小心吸去孔板内的旧培养基。操作时应将枪头贴壁缓慢吸取，避免枪头直接接触并吹打到底部的细胞层，防止物理损伤。每孔加入 2 mL 新鲜的预热 TeSR™-E6 培养基。

4.  放回培养箱：将培养板轻轻摇匀，使培养基覆盖均匀，放回 37℃、5% CO? 及饱和湿度的细胞培养箱中。

第二部分：细胞传代操作（以 EDTA 温和消化为例）

当细胞融合度达到 70%-80%（通常在接种后 3-4 天），且克隆中心开始出现重叠或轻微分化时，需要进行传代。

1.  制备包被板：提前一天或至少提前 1 小时，在新的培养板中加入稀释好的细胞外基质包被液（如 Matrigel 或 Geltrex），确保底部均匀覆盖，置于 37℃ 孵育。使用前吸除包被液，用无菌 PBS 轻轻润洗一次。

2.  消化细胞：吸除旧培养基，用 DPBS（不含钙镁离子）轻轻洗涤细胞一次。加入预热的 0.5 mM EDTA 消化液，淹没孔底即可。将培养板放回 37℃ 培养箱孵育 3-5 分钟。

3.  终止消化：在显微镜下观察到克隆边缘变得松散、细胞间隙增大时，立即取出培养板。加入 2 倍体积的 TeSR™-E6 培养基（含 Rock 抑制剂 Y-27632，浓度 10 μM，以提高单细胞存活率）轻柔吹打终止消化。

4.  细胞重悬与接种：用无菌吸管或移液器将细胞轻轻吹打重悬（避免过度吹打产生气泡），按 1:6 到 1:10 的比例将细胞悬液转移至预先准备好的新包被培养板中。补充适量新鲜的 TeSR™-E6 培养基，轻轻十字摇匀，放回培养箱。

第三部分：细胞冻存与复苏

•   冻存：将处于对数生长期的细胞用 Accutase 或 TrypLE 解离成单细胞，离心收集。用预先冰浴的冻存液（如 CryoStor CS10 或无血清冻存液）重悬细胞至 1-5 × 10? cells/mL。分装至冻存管，置于程序降温盒中，-80℃ 过夜后转入液氮长期保存。

•   复苏：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴锅摇晃至刚刚融化（约 90 秒）。在超净台内将细胞悬液转移至含有 5 mL TeSR™-E6 培养基（含 Rock 抑制剂）的离心管中，300 g 离心 5 分钟。弃上清，用 1 mL 新鲜培养基重悬，接种至预先包被好的 24 孔板中央，补加培养基至总体积 2 mL。

七、 常见问题与深度解决方案 (Troubleshooting)

问题一：细胞复苏后存活率极低，大面积漂浮死亡

•   深度归因：无血清培养基对单细胞应激极为敏感。如果在冻存前细胞未达到最佳活力，或者冻存液不适合无血清环境，细胞极易发生凋亡。此外，复苏时未使用 Rock 抑制剂也是主因之一。

•   解决方案：确保冻存前细胞状态良好且无分化迹象。复苏后的前 48 小时内，务必在 TeSR™-E6 中添加 10 μM 的 Y-27632（Rock 抑制剂）以支持细胞贴壁和铺展。检查冻存液渗透压，建议使用专为无血清细胞设计的低 DMSO 冻存液。

问题二：细胞传代后生长极其缓慢，迟迟不形成克隆

•   深度归因：这通常是由于传代比例过低（接种太稀）或细胞外基质（ECM）包被失效导致的。TeSR™-E6 缺乏血清中的粘附促进因子，对底物包被的要求高。

•   解决方案：提高接种密度，初次传代建议使用 1:3 到 1:5 的比例。重新配制 Matrigel 或 Vitronectin 包被液，确保胶原蛋白浓度达标，且包被时间足够（至少 1 小时，最好 4℃ 过夜）。

问题三：培养基颜色变黄过快（pH 骤降）

•   深度归因：细胞密度过高，代谢过于旺盛，产生了大量乳酸；或者培养箱 CO? 浓度失控（偏高）；也可能是由于污染（细菌快速产酸）。

•   解决方案：增加每日换液频率至每天两次（早/晚各一次），或扩大传代比例。检查培养箱 CO? 探头是否需要校准。如果怀疑污染，立即丢弃细胞并消毒超净台。

问题四：干细胞克隆形态异常（如扁平、边界不清、出现囊状结构）

•   深度归因：这是典型的早期分化迹象。虽然 TeSR™-E6 去除了 bFGF 和 TGF-β，但如果培养环境中有意外的分化诱导因子（如内毒素污染的试剂），或者细胞本身多能性基因表达已下调，就会发生自发分化。

•   解决方案：使用未分化标志物（如 Tra-1-60 或 SSEA-4）进行免疫荧光染色确认。若是轻微分化，可手动刮除分化区域；若大面积分化，建议终止该批次细胞，重新复苏早期冻存的健康细胞。

问题五：细胞在传代消化时极易脱落成片，难以解离成单细胞

•   深度归因：细胞融合度超标（超过 90%），克隆之间互相挤压堆叠，导致细胞与基质之间的黏附力（通过整合素介导）过强。此外，EDTA 浓度不足或作用时间不够也会导致钙依赖性黏附分子（如 E-cadherin）无法有效解离。

•   解决方案：严格控制传代时机，在 70%-80% 融合度时及时传代?？墒实碧岣?EDTA 浓度至 0.5 mM 或延长室温下消化时间至 5-7 分钟，并辅以轻柔的机械吹打辅助解离。

问题六：流式细胞术检测时发现背景荧光较高

•   深度归因：尽管 TeSR™-E6 是无血清配方，但其中含有的重组蛋白或细胞在凋亡/坏死时释放的碎片可能会与荧光标记的抗体发生Fc段非特异性结合。

•   解决方案：在染色前使用 Fc 受体阻断剂（Fc Receptor Blocking Solution）处理细胞。增加洗涤步骤（DPBS + 2% BSA 洗涤 2-3 次），并确?？固逑∈鸵褐泻惺柿康牡疲∟aN?）和 BSA 以降低非特异性结合。

关键词：STEMCELL，STEMCELL上海代理，STEMCELL中国代理，STEMCELL北京代理，STEMCELL江苏代理， STEMCELL广东代理,100-1061, 07930, 03820, 10981, 17951, 85850, 10971, 19844, 18000, 100-0276, 100-0483, 85450, 07920, 07851, 20144, 85850-500ml, 78036, 05455, 10970, 19765, 05946, 85415, 17952、TeSR-E6培养基、多能干细胞培养基、干细胞分化培养基、成分明确无血清培养基、无异种成分干细胞培养、TeSR-E6说明书、人胚胎干细胞培养、诱导多能干细胞培养、去除bFGF和TGF-β培养基、干细胞定向分化试剂、无饲养层细胞培养基、StemCell Technologies培养基、TeSR-E6 货号、干细胞维持与分化、无血清细胞培养方案、干细胞单细胞传代、TeSR-E6 使用方法、干细胞培养常见问题、临床级干细胞培养基、再生医学研究试剂

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

??热卖产品